转PmHSP25.3基因香石竹植株耐热性研究

【摘要】香石竹(DianthuscaryophyllusL.),也称康乃馨(carnation),观赏价值高,作为四大切花之一,在花卉市场上有很大的销量。原产地中海沿岸,喜阴凉、干燥环境。在我国,夏季高温,会影响到切花品质,因此培育耐热品种是香石竹的重要育种目标之一。本研究是以香石竹品种‘想向’为材料,通过根癌农杆菌介导法向香石竹中导入梅花小热激蛋白PmHSP25.3基因,在抗性筛选、PCR检测基础上,获得转基因植株,并对转基因植株和对照在高温胁迫下生理生化指标的变化进行了相关研究。主要研究结果如下：1、遗传转化研究将香石竹叶片接种在分化培养基MS+1.Omg/LBA+0.3mg/LNAA上预培处理2d,然后用农杆菌侵染8-12min,在含100mmol/LAS的培养基上共培处理3d,转入加有60mg/LKan+400mg/LCef选择培养基上继续培养,当长出的抗性芽高度达1cm左右时,转入MS+O.lmg/LNAA+25mg/LKan+400Cef的生根培养基上生根。在遗传转化时,不同农杆菌菌株侵染带叶基叶片,所得‘想向’抗性芽再生率有较大差异。EHA105菌株侵染所得再生率约达到3.33%,而GV3101约为0.41%。对抗性植株进行DNA提取,PCR检验,在2个株系中检测到目的基因条带。2、高温胁迫耐热性研究将转基因和对照香石竹组培苗进行不同温度处理,结果表明,转基因香石竹幼苗致死温度为49℃,非转化苗为45℃。在38℃高温下,分别胁迫0、2、4、6、8d,胁迫后剪取叶片,冷冻保存,测定其生理生化指标。结果表明：高温胁迫处理后,转基因香石竹组培苗叶片中可溶性蛋白质、可溶性糖含量、SOD活性均高于对照,而叶绿素总量、丙二醛含量低于对照。
【作者】吴姗姗；
【导师】张俊卫；
【作者基本信息】华中农业大学，园林植物与观赏园艺，2014，硕士
【关键词】香石竹；小热激蛋白；遗传转化；高温胁迫；生理生化指标；耐热性；

【参考文献】
[1]姜松.铝合金与钛合金接触腐蚀性能研究[D].西安工业大学,材料加工工程,2014,硕士.
[2]刘杰.现代汉语缩略语论析[D].安徽大学,汉语言文字学,2004,硕士.
[3]王平.160KA电解槽扩容改造的研究[D].中南大学,有色金属冶金,2004,硕士.
[4]高红静.概念设计的逻辑与表达[D].大连理工大学,建筑设计及其理论,2004,硕士.
[5]陈爱美.越桔的组织培养及杜鹃类菌根真菌对越桔组培苗的生理效应研究[D].西南农业大学,果树学,2004,硕士.
[6]陈翠婷.晚清清流派与中法越南交涉[D].山东师范大学,专门史,2013,硕士.
[7]孙亮.加强市政工程管理的方法与措施[D].齐鲁工业大学,材料工程,2013,硕士.
[8]郑杰宏.砌体建筑中潮湿病害问题的实验研究[D].华中科技大学,建筑技术科学,2013,硕士.
[9]杨勇.亲代大鼠神经病理性疼痛对子代情绪行为学的影响及与杏仁核DNA甲基化的关系[D].中南大学,临床医学,2013,博士.
[10]陈建国,杨英杰,马范援.DMIDS:应用数据挖掘技术的网络入侵检测系统实现[J].计算机工程,2003,14:120-121+142.
[11]刘燕.奉新县供电公司配网管理信息系统的分析与设计[D].云南大学,软件工程,2012,硕士.
[12]白伟伟.方东美对原始儒道时空观念的阐释[D].西南大学,美学,2014,硕士.
[13]陈晨.要素流视角的沈阳城市空间扩展研究[D].东北师范大学,人文地理学,2012,硕士.
[14]张仙鹏.磁性金属纳米颗粒的自组装生长与磁学性能研究[D].山西师范大学,原子与分子物理,2013,硕士.
[15]田生.开发测试云平台的设计与实现[D].北京交通大学,2014.
[16]麻盼盼.马克思主义科技创新型人才素质提升问题探索[D].苏州大学,马克思主义基本原理,2012,硕士.
[17]文碧生.第四次西部地区石油物探技术研讨会在新疆鄯善召开[J].石油地球物理勘探,1994,06:677.
[18]陈雯舒.基于建构主义的音乐课堂教学结构研究[D].中国音乐学院,音乐学,2014,硕士.
[19]李泳泉,李杏春.刚果民主共和国金矿类型及主要地质特征[J].世界地质,2014,04:822-836.
[20]刘宪民,花峰,刘蕤,郝锡秀.热处理对30CrMnSiNi2A钢力学性能的影响[J].钢铁.2003(01)
[21]朱治中,于尔铿,刘亚芳,周京阳.电力市场的效率问题[J].电力系统自动化,2005,13:1-4.
[22]冯光洁.提高乌海一中信息技术课教学有效性的策略[D].内蒙古师范大学,教育管理（专业学位）,2013,硕士.
[23]黄策.严寒地区商场建筑冬季热舒适研究[D].哈尔滨工业大学,建筑技术科学,2013,硕士.
[24]张建交.纳米氧化锌的水热合成及其气敏性能[D].哈尔滨理工大学,材料学,2014,博士.
[25]石璐铭.B、Y对高温钛合金组织性能影响的研究[D].哈尔滨工业大学,材料加工工程,2014,硕士.
[26]刘尧.基于RFID物联网的猪肉信息跟踪追溯系统开发[D].南京农业大学,动物营养与饲料科学,2012,硕士.
[27]张杨.基于任务的高中英语课堂合作学习的研究[D].河北师范大学,学科教学,2013,硕士.
[28]张文文.隐性知识共享对团队效能的影响研究[D].山东财经大学,企业管理,2014,硕士.
[29]黄惠源.漫谈我国海洋渔业可持续发展[J].现代渔业信息.2002(03)
[30]刘涛,刘贺平.一种基于死区离散趋近律的准滑模控制[J].自动化学报,2011,06:760-766.
[31]梁旭辉.可持续发展观与哲学范式的转换[D].华东师范大学,马克思主义理论与思想政治教育,2003,硕士.
[32]潘丽英.基于电喷雾电离质谱分析的人肝癌细胞HepG2与正常肝细胞L02 N，O-糖链的定性定量比较[D].西北大学,细胞生物学,2014,硕士.
[33]任鑫.基于数字图象处理技术的炉膛火焰检测系统的研究[D].华北电力大学（北京）,控制理论与控制工程,2003,硕士.
[34]孙男.产品市场竞争，资本市场条件与资本预算[D].清华大学,技术经济与管理,2003,硕士.
[35]张维秋.大肠杆菌中国分离株质粒介导的喹诺酮类药物耐药性的流行特征[D].扬州大学,预防兽医学,2011,硕士.
[36]王玫.益气宣肺汤治疗肺气虚寒型常年性变应性鼻炎临床疗效观察[D].福建中医药大学,中医五官科学（专业学位）,2013,硕士.
[37]马洁然.幼儿教师育儿焦虑的现状及对策研究[D].华东师范大学,学前教育学,2013,硕士.
[38]张海亮.66例咽淋巴环弥漫性大B细胞淋巴瘤临床特性及预后分析[D].山西医科大学,影像医学与核医学,2013,硕士.
[39]张爱莉.室内空间意境创造的研究[D].南京林业大学,木材科学与技术,2004,硕士.
[40]曾烨然.食品企业DN公司的危机管理策略研究[D].上海外国语大学,工商管理,2014,硕士.
[41]李健林.粮食质量安全溯源关键技术研究[D].中南林业科技大学,森林工程,2013,硕士.
[42]胡焱.新闻传播学视野下的农家书屋建设研究[D].安徽大学,新闻学,2014,硕士.
[43]陈俊.论职务犯罪侦查规律及在渎职侵权案件侦查工作中的运用[D].华中科技大学,经济法学,2013,硕士.
[44]高旭,胥桂仙,孙集伟,牛四清,王宁.一起典型的500kV失灵保护误动分析[J].电力系统自动化,2007,08:104-106.
[45]张连军.长江汽渡船舶远程监控管理系统研究[D].江苏科技大学,控制工程,2014,硕士.
[46]杨漫欣.初中学习不良学生的元认知调节特征及训练[D].首都师范大学,发展与教育心理学,2004,硕士.
[47]于林月,张力,陈龙.京津冀一体化背景下促进北京高校毕业生就业的新思路[J].新视野,2015,03:96-100.
[48]刘武警.基于本体的电网应急案例表示方法研究[D].哈尔滨工业大学,管理科学与工程,2013,硕士.
[49]崔广才.基于粗糙集的数据挖掘方法研究[D].吉林大学,2004.
[50]龚景森.锚栓焊接钢筋加固混凝土梁抗弯性能试验研究[D].广东工业大学,桥梁与隧道工程,2013,硕士.